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ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

更新時(shí)間:2024-03-27

簡(jiǎn)要描述:

脂質(zhì)體包括的氯膦酸二鈉脂質(zhì)體和PBS,用于小鼠等動(dòng)物體外或者體外清除單核巨噬細胞。ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝。

ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

品牌 LIPOSOMA 貨號 CP-005-005
規格 5ml+5ml 供貨周期 現貨
主要用途

ClodronateLiposomes(氯膦酸二鈉脂質(zhì)體+PBS對照脂質(zhì)體)

應用領(lǐng)域 生物科研,醫學(xué)研究,

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

清除巨噬細胞(depletion of macrophages)是研究巨噬細胞功能的重要方法。荷蘭阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授開(kāi)發(fā)的一款Clodronate Liposomes,可以利用巨噬細胞的內吞機制,將脂質(zhì)體包裹的膜不通透性的氯磷酸(clodronate)帶入細胞內,利用“特洛伊木馬機制”從而達到去除巨噬細胞的目的。

作用原理:

兩親性磷脂分子在水中可以形成同心圓形式的磷脂雙分子層球體,磷脂雙分子層中間通過(guò)水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸鹽在形成脂質(zhì)體的過(guò)程中被包裹進(jìn)磷脂雙分子層之間的水相中(如圖1)。游離的氯磷酸鹽不能自由的通過(guò)脂質(zhì)體的磷脂雙分子層。隨著(zhù)脂質(zhì)體被巨噬細胞吞噬,在巨噬細胞溶酶體磷酸酶的作用下,溶解在脂質(zhì)體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來(lái),并累積在細胞內,當其達到一定濃度時(shí),巨噬細胞將會(huì )受到不可逆轉的損傷,從而進(jìn)入凋亡過(guò)程。從死亡的巨噬細胞中釋放出來(lái)的氯磷酸鹽在細胞外的半衰期極短(大約15min),可以通過(guò)泌尿系統排除體外。

CLODRONATE LIPOSOMES & CONTROL LIPOSOMES (PBS)

氯膦酸鹽脂質(zhì)體和對照脂質(zhì)體(PBS)

SKU: CP-005-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質(zhì)體CP-005-005構成:

氯膦酸鹽脂質(zhì)體:

由同心磷脂雙層構成的人造球,該雙層包裹著(zhù)含有氯膦酸鹽的PBS(磷酸鹽緩沖液)水溶液。脂質(zhì)體是顆粒,大小大。3微米。它們在PBS中形成懸浮液,在儲存時(shí)會(huì )沉淀,在試管或燒瓶的底部形成沉淀。在對實(shí)驗動(dòng)物給藥之前,應先搖晃懸浮液,以回收均勻的懸浮液。

對照脂質(zhì)體(PBS):

對照脂質(zhì)體不含氯膦酸鹽。它們僅含有PBS,可用于對照實(shí)驗,以查明注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體后觀(guān)察到的效果是否僅是由于巨噬細胞耗竭所致。

clodronateliposomes脂質(zhì)體CP-005-005產(chǎn)品描述

磷脂雙層由磷脂酰膽堿和膽固醇組成。將所有脂質(zhì)體制劑懸浮在無(wú)菌磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中:

– 10 mM的Na2HPO4;

– 10毫米NaH2PO4;

– 140毫米氯化鈉。

 

我們所有的脂質(zhì)體均帶負電荷,因此不會(huì )一起阻塞。懸浮液中的脂質(zhì)體沒(méi)有大小,這意味著(zhù)它也包含越來(lái)越大的脂質(zhì)體(大3微米)。平均而言,脂質(zhì)體的大小為1.7微米。

氯膦酸鹽脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,包裹了氯膦酸鹽。懸浮液中氯膦酸鹽的濃度約為。5毫克/毫升 氯膦酸鹽以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式封裝在脂質(zhì)體囊泡中。

PBS脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,其中包裹了PBS水溶液。這些不含氯膦酸鹽,可用于對照實(shí)驗。

熒光DiI脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,其中包封了PBS水溶液,并用熒光染料DiI標記。它們不含氯膦酸鹽,可用于研究通過(guò)特定給藥途徑注射的脂質(zhì)體是否能夠到達要研究的巨噬細胞。

 

儲存和使用說(shuō)明

到達脂質(zhì)體后,應將其儲存在4 – 8ºC(或39 – 47ºF)之間。脂質(zhì)體懸浮液不得冷凍,也不要暴露于高溫下。這可能會(huì )對磷脂雙層造成干擾,可能導致氯膦酸鹽從脂質(zhì)體中泄漏出來(lái)。

給藥前,首先使脂質(zhì)體達到室溫,然后輕輕搖動(dòng)或攪拌懸浮液。一段時(shí)間后,脂質(zhì)體易于沉淀,導致小瓶中的分布不均勻。當注射花費太多時(shí)間時(shí),脂質(zhì)體甚至可能在注射器中沉淀。如果使用同一注射器注射多只動(dòng)物,可能會(huì )導致劑量不同。

不建議稀釋?xiě)腋∫?,但如有必要,請使用PBS或鹽水。

我們建議客戶(hù)在發(fā)貨后16周內使用脂質(zhì)體制劑。強烈建議不要在到期日期之后使用。在此期間之后,污染的風(fēng)險會(huì )增加,并且可能會(huì )發(fā)生輕微的功能喪失。

作用機理

巨噬細胞在免疫和非免疫防御機制中起重要作用。它們是抵御滲透到脊椎動(dòng)物體內的細菌,病毒和其他形式的微生物污染的首道防線(xiàn)。巨噬細胞是大型細胞,幾乎存在于所有身體組織中,它們可以具有不同的形式和名稱(chēng)(例如庫普弗細胞,肺泡巨噬細胞,小膠質(zhì)細胞,破骨細胞,紅髓巨噬細胞)。巨噬細胞“清除”,它們攝入并消化可能是潛在病原體的所有異物,微生物,癌細胞和細胞碎片。該過(guò)程稱(chēng)為吞噬作用。巨噬細胞主要通過(guò)可溶性分子如細胞因子和趨化因子的介導來(lái)進(jìn)一步調節許多非吞噬細胞的功能。他們參與先天免疫,

脂質(zhì)體是人工制備的球體,由同心磷脂雙層組成。當磷脂分散在水中時(shí),親水性頭部將構成脂質(zhì)體的兩個(gè)外部部分,而疏水性脂肪酸基團將構成內部部分(見(jiàn)圖1)。水室分隔雙層,親水分子可以溶解在其中,形成脂質(zhì)體包封的分子。氯膦酸鹽(二氯亞甲基雙膦酸酯或Cl2MBP)是一種親水性分子,可以封裝在磷脂雙層中。游離氯膦酸鹽不易穿過(guò)細胞膜,并通過(guò)腎臟系統從循環(huán)中迅速清除(即數分鐘內)。但是,氯膦酸鹽脂質(zhì)體包埋在脂質(zhì)體中時(shí),會(huì )被巨噬細胞吞噬,無(wú)法逃脫(見(jiàn)圖2)。磷脂雙層被溶酶體磷脂酶消化,而氯膦酸鹽未被消化并且保留在巨噬細胞中。巨噬細胞攝入的磷脂雙層和脂質(zhì)體越多,在巨噬細胞內積累的氯膦酸鹽越多。超過(guò)一定的細胞內濃度,氯膦酸鹽將通過(guò)啟動(dòng)程序性細胞死亡(即凋亡)來(lái)消除巨噬細胞。

機制氯膦酸鹽脂質(zhì)體

圖1.氯膦酸鹽脂質(zhì)體的示意圖。囊泡由同心的磷脂雙層構成,被水性隔室隔開(kāi)。雙層由親水和疏水基團組成。將氯膦酸鹽(在此以黑色方塊表示)溶解在水溶液中并封裝在脂質(zhì)體內。

 

氯膦酸鹽脂質(zhì)體通過(guò)巨噬細胞攝取和消化的示意圖。

圖2.巨噬細胞對氯膦酸鹽脂質(zhì)體的攝取和消化示意圖。巨噬細胞通過(guò)胞吞作用攝入氯膦酸鹽脂質(zhì)體,然后與含有磷脂酶的溶酶體(L)融合(箭頭)。磷脂酶破壞的磷脂雙層越多,在巨噬細胞內釋放的氯膦酸鹽(黑色方塊)越多。巨噬細胞終通過(guò)凋亡被殺死。(N =巨噬細胞核)。

因此,氯膦酸鹽脂質(zhì)體可用于通過(guò)消耗巨噬細胞來(lái)研究巨噬細胞功能。例如,它們可以應用于各種自身免疫性疾病,移植,神經(jīng)系統疾病和基因治療的模型。氯膦酸鹽脂質(zhì)體只有在可以達到的情況下才能耗盡巨噬細胞。一些組織可以形成脂質(zhì)體的屏障。通過(guò)選擇氯膦酸鹽脂質(zhì)體的正確給藥途徑,可以耗盡特定的器官或組織的巨噬細胞。有關(guān)管理協(xié)議的更多信息,請單擊此處。

 

PBS脂質(zhì)體主要用于對照實(shí)驗。但是,這些也可以在某些時(shí)間段內通過(guò)飽和來(lái)阻止吞噬作用。因此,PBS脂質(zhì)體不能代表正常健康的,未阻斷的,未抑制的和未活化的巨噬細胞的對照實(shí)驗。當比較氯膦酸鹽脂質(zhì)體和PBS脂質(zhì)體的作用時(shí),其作用因此可能小于預期。

有關(guān)更多信息,請參見(jiàn):

– Van Rooijen,N.和Sanders,A.(1994)。脂質(zhì)體介導的巨噬細胞耗竭:作用機理,脂質(zhì)體制備和應用。免疫學(xué)雜志,174(1-2),83-93。

– Van Rooijen,N.,Sanders,A.和van den Berg,TK(1996)。脂質(zhì)體介導的氯膦酸鹽和丙am的細胞內遞送誘導的巨噬細胞凋亡。免疫學(xué)雜志,193(1),93-99。

 

ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

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